1 前言

左旋肉碱(L-肉碱)又称肉毒碱，是一种水溶性氨基酸，由赖氨酸衍生而来。分子结构为L-γ-三甲胺β-羟丁酸，分子式为C7H16NO3，分子量为161.2。它是B族维生素类似物，曾被称为维生素BT。其分子结构中含有一个可供脂肪酸脂化的羟基，其饱和键和极性官能团有良好的水溶性和吸湿性，200℃以上它仍稳定存在，可在PH3-6的溶液中放置一年以上而不变坏。1998年我国卫生部将L-肉碱批准为食品添加剂，列入营养强化剂类。

海能仪器利用全新高性能的Hanon LC7000高效液相色谱仪，经实践检测饲料中L-肉碱的含量，得出的结果准确可靠，检出限好，适用于饲料中L-肉碱的测定，供广大用户参考。

2　 仪器与试剂

2.1 仪器

Hanon LC7000高效液相色谱仪

Vertex 色谱柱　C18 250mm×4.6mm×5μm

实验室常用仪器设备

超声波水浴

分析天平(感量0.001g)

0.45μm水性滤膜

2.2 试剂

异丙醇，色谱纯。

甲醇，色谱纯。

乙腈，色谱纯。

磷酸氢二钠。

磷酸二氢钾。

三乙醇胺。

柠檬酸。

氧化银。

肉碱衍生剂。

2.3 测定原理

样品经加乙醇超声提取后，然后加入肉碱衍生剂，将衍生物注入高效液相色谱反相柱上进行分离，用紫外检测器在210nm波长处定量测定。

2.4 试样溶液的制备

称取5g试样于100ml烧杯中，加入30ml无水乙醇，溶解并转移至100ml容量瓶中，先后用10ml无水乙醇分3次洗涤烧杯，样液转移至100ml容量瓶中，超声提取10min后用无水乙醇定容至刻度，混匀后于4000r/min离心5min。取上清液2ml，加入肉碱衍生剂0.25ml(衍生剂配制方法：40 mg P-苯酰溴溶解于1.0 ml乙腈，加入40% 氢氧化四丁基铵50 µl)，混合后置于60℃恒温水温箱120 min，吸取20 µl进样分析。

2.5 色谱条件

色谱柱：Vertex C18柱　250mm×4.6mm×5μm;

流动相：甲醇：磷酸盐=5:95

流速：1.0mL/min;

温度：室温;

进样量：20μL;

检测波长：210nm。