证券简称:海能仪器
证券代码:430476
       
       

液相色谱法检测饲料中L-肉碱

1 前言

左旋肉碱(L-肉碱)又称肉毒碱,是一种水溶性氨基酸,由赖氨酸衍生而来。分子结构为L-γ-三甲胺β-羟丁酸,分子式为C7H16NO3,分子量为161.2。它是B族维生素类似物,曾被称为维生素BT。其分子结构中含有一个可供脂肪酸脂化的羟基,其饱和键和极性官能团有良好的水溶性和吸湿性,200℃以上它仍稳定存在,可在PH3-6的溶液中放置一年以上而不变坏。1998年我国卫生部将L-肉碱批准为食品添加剂,列入营养强化剂类。

海能仪器利用全新高性能的Hanon LC7000高效液相色谱仪,经实践检测饲料中L-肉碱的含量,得出的结果准确可靠,检出限好,适用于饲料中L-肉碱的测定,供广大用户参考。

2  仪器与试剂

2.1 仪器

Hanon LC7000高效液相色谱仪

Vertex 色谱柱 C18 250mm×4.6mm×5μm

实验室常用仪器设备

超声波水浴

分析天平(感量0.001g)

0.45μm水性滤膜

2.2 试剂

异丙醇,色谱纯。

甲醇,色谱纯。

乙腈,色谱纯。

磷酸氢二钠。

磷酸二氢钾。

三乙醇胺。

柠檬酸。

氧化银。

肉碱衍生剂。

2.3 测定原理

样品经加乙醇超声提取后,然后加入肉碱衍生剂,将衍生物注入高效液相色谱反相柱上进行分离,用紫外检测器在210nm波长处定量测定。

2.4 试样溶液的制备

称取5g试样于100ml烧杯中,加入30ml无水乙醇,溶解并转移至100ml容量瓶中,先后用10ml无水乙醇分3次洗涤烧杯,样液转移至100ml容量瓶中,超声提取10min后用无水乙醇定容至刻度,混匀后于4000r/min离心5min。取上清液2ml,加入肉碱衍生剂0.25ml(衍生剂配制方法:40 mg P-苯酰溴溶解于1.0 ml乙腈,加入40% 氢氧化四丁基铵50 µl),混合后置于60℃恒温水温箱120 min,吸取20 µl进样分析。

2.5 色谱条件

色谱柱:Vertex C18柱 250mm×4.6mm×5μm;

流动相:甲醇:磷酸盐=5:95

流速:1.0mL/min;

温度:室温;

进样量:20μL;

检测波长:210nm。


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