凯氏定氮法测血粉中蛋白质含量

1.1实验原理

血粉中的有机态氮在浓硫酸和催化剂的共同作用下，转化为氨态氮。加碱蒸馏，使氨析出，用硼酸吸收后，再以盐酸或硫酸标准滴定液进行滴定。

1. 2 仪器与设备

K1100F 全自动凯氏定氮仪

SH 420F 石墨消解仪

1. 3 试剂与耗材

实验中涉及到的试剂，均为优级纯或分析纯；实验用水为无氨蒸馏水。

1.3.1 盐酸或硫酸溶液：c(H ⁺ )= 0 . 1mol /L ，标准滴定液。

1. 3 . 2 硼酸溶液：质量分数 2% 。

1. 3. 3 氢氧化钠溶液：质量分数 40% 。

1. 3. 4 溴甲酚绿 - 甲基红混合指示剂：将溴甲

酚绿乙醇溶液 (1g/ L) 与甲基红乙醇溶液(1g/ L) 按 5 ： 1 体积比临时混合摇匀备用。

1. 3 . 5 催化剂片： 3g 硫酸钾和 0. 2g 硫酸铜混合均匀压片

1. 4 实验过程

1 . 4 . 1 取样

将样品均匀混合后称量 0.3g （精确至 0 . 1mg ），加催化剂一片（或硫酸钾 3g 与硫酸铜 0 . 2g) ，再沿瓶壁滴加硫酸 10 . 0mL 。

1 . 4 .2 消解

利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，设定消解温度参数如下表：

消化完毕后，将消化管取下冷却。

1 . 4 . 3 上机测试

待消化管内溶液冷却至室温后，将消化管放置于定氮仪上，开始蒸馏滴定。定氮仪设置程序如下：

式中：M-标准酸摩尔浓度（mol/L)

W-样品质量（g）

V0-空白样滴定标准酸消耗量（mL）

V-样品滴定标准酸消耗量（mL）

6.25-样品蛋白系数

结果与讨论

经测试，使用凯氏定氮仪测试血粉中粗蛋白含量，结果准确，平行性良好。符合一级血粉粗蛋白标准。