海能技术
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凯氏定氮法测定骨胶原肽中蛋白质含量

1 前言

鲜骨含有人体需要的多种营养物质,但不易直接食用,利用酶法将骨胶原蛋白水解成骨胶原多肽,有利于人体消化吸收。在《5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》中蛋白质测定方法有凯氏定氮法,分光光度法以及燃烧法。其中以凯氏定氮法应用最为广泛。凯氏定氮法是将样品中的有机态氮在浓硫酸和催化剂的共同作用下,转化为氨态氮。加碱蒸馏后,用硼酸吸收后,再以盐酸或硫酸标准滴定液进行滴定,具有结果准确等优点。但传统的玻璃仪器具有操作繁琐,耗时长,危险性高等缺点。本文以全自动凯氏定氮仪进行实验,结果准确,操作简单。

2 仪器与试剂

2.1仪器

K1160全自动凯氏定氮仪,SH420F石墨消解仪



2.2试剂

硫酸(分析纯),硼酸(分析纯),氧化钠(分析纯),溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,催化剂片(3g硫酸钾和0.2g硫酸铜混合均匀压片),0.1mol/L盐酸标准滴定液。

3 实验方法

3.1取样

0.2g左右样品,加催化剂一片(或硫酸钾3g与硫酸铜0.2g),再沿瓶壁滴加硫酸10.0ml

3.2消解

利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,消化完毕后,将消化管取下冷却至室温。消化过程采用曲线升温模式,设置参数如下:






3.3 上机测试

待消化管内溶液冷却至室温后,将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下:


式中:c-标准酸摩尔浓度(mol/L)

W-样品质量(g

V0-空白样滴定标准酸消耗量(mL

V-样品滴定标准酸消耗量(mL),精确到小数点后四位








4.2结论

通过数据可知,利用全自动凯氏定氮法测定骨胶原肽粉中的蛋白质含量平行性良好,且具有操作简单,安全性高,节省人力等优点。

参考文献

[1]GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定[S].

注意事项

样品中蛋白含量较高,取样及消解时应注意减少误差。可以用称量纸包裹住样品投入消化管中,以防止样品粘在消化管上部。实验过程中浓酸浓碱较为危险,请小心操作。