前言

初乳碱性蛋白是从牛初乳中仅能萃取出万分之四的珍贵蛋白，CBP是国际上近几年最新提取成功并用于保健领域的初乳精华。测定初乳碱性蛋白中的蛋白质含量，既是对其质量把控的一个重要指标，也是国家对于营养标签的一个具体要求。

实验部分

1. 1仪器与设备

K1100F 全自动凯氏定氮仪

SH 420F 石墨消解仪

 

1. 2试剂与耗材

实验中涉及到的试剂，均为优级纯或分析纯；实验用水为无氨蒸馏水。

1. 2 . 1 盐酸或硫酸溶液：c(H ⁺ )= 0 . 1mol /L ，标准滴定液。

1. 2 . 2 硼酸溶液：质量分数 2% 。

 

1. 2. 3 氢氧化钠溶液：质量分数 40% 。

1. 2. 4 溴甲酚绿 - 甲基红混合指示剂：将溴甲

酚绿乙醇溶液 (1g/ L) 与甲基红乙醇溶液(1g/ L) 按 5 ： 1 体积比临时混合摇匀备用。

1. 2 .5 催化剂片： 3g 硫酸钾和 0. 2g 硫酸铜混合均匀压片

1.3 实验过程

1 . 3 . 1 取样

称量 0.1g 的样品（精确至 0 . 1mg ），加催化剂一片（或硫酸钾 3g 与硫酸铜 0 . 2g) ，再沿瓶壁滴加硫酸 10 . 0mL 。

1 . 3 .2 消解

利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，设定消解温

度参数如下表：

	温度（℃）	时间（min）
1	180	15
2	420	60

温度 曲线仅 供参考

消化完毕后，将消化管取下冷却。

1 . 4 . 3 上机测试

待消化管内溶液冷却至室温后，将消化管放置于定氮仪上，开始蒸馏滴定。定氮仪设置程序如下：

 

硼酸	25mL
稀释水	30mL
碱液	35mL
蒸馏量	5min
蒸汽流量	100%

     

结果与讨论

                                                                

1 . 4 . 4 仪器自动滴定并给出计算结果。

式中：M-标准酸摩尔浓度（mol/L)

 W-样品质量（g）

 V0-空白样滴定标准酸消耗量（mL）

 V-样品滴定标准酸消耗量（mL）