海能技术
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凯氏定氮法测定小白鼠饲料中蛋白质含量


1 前言

小鼠应喂给颗粒性饲料,即将麦粉、玉米面、麦麸、豆饼、鱼粉、草粉等按配方混合后制成干燥块料或粒料。小白鼠的食量虽小,但对饲料质量的要求相对较高,必须保持营养物质的平衡稳定,富有蛋白质等,否则对其发育、繁殖和抗病能力会造成严重影响。

2 实验部分

2.1原理

样品在浓硫酸和催化剂的共同作用下,由有机态的氮转化为氨态氮。加碱蒸馏后,用硼酸吸收后,再以硫酸标准滴定液进行滴定。

2.2 仪器与试剂、器具

2.2.1 K1100F全自动凯氏定氮仪(济南海能仪器股份有限公司)。

2.2.2 SH420F石墨消解仪(济南海能仪器股份有限公司)。

2.2.3 硫酸 分析纯,c(HCL)=0.1mol/L,标准滴定液。

2.2.4 硼酸 分析纯,质量分数2%。

2.2.5 氢氧化钠 分析纯,质量分数40%。

2.2.6 溴甲酚绿-甲基红混合指示剂 将溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L)与甲基红乙醇溶液(1g/L)按5+1体积比临时混合摇匀备用。

2.2.7 催化剂片 3g硫酸钾和0.2g硫酸铜混合均匀压片

2.2.8 10ml移液管

2.2.9 称量瓶

2.2.10粉碎机

2.3 实验部分

2.3.1制备:将用粉碎机打碎且混合均匀的样品称取0.5g左右,用称量纸包好后一并投入消化管中,加一片催化剂片(或者3g硫酸钾、0.2g硫酸铜),加入10ml浓硫酸。

2.3.2消解:利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,消化完毕后,将消化管取下冷却至室温。消化过程采用直线升温模式,逐渐升温至420度,消解1小时。

2.3.3 待消化管内溶液冷却至室温后,将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下:

硼酸:35ml

碱:40ml

蒸馏时间:5min

2.3.4 仪器自动滴定并给出计算结果。

蛋白质含量  P%=N(%)×6.25

式中:M-标准酸摩尔浓度(mol/L)

W-样品质量(g)

V0-空白样滴定标准酸消耗量(mL)

V-样品滴定标准酸消耗量(mL),精确到小数点后四位

3 结果与讨论